武漢默沙克生物????科技有限公司是一家專門從事生物制劑研發(fā)與生產的企業(yè)。目前可提供各種抗1體、***學***盒、生化***、ELISA***盒、分子生物學***等多用途多屬種的高品質產品，服務涉及分子生物學、細胞生物學、***學等生命科學領域。

假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇，例如HBsAg的a決定簇，也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結合物。但在HBsAg的檢測中應注意亞型問題，HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個亞型，雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應性，這也是用單抗作夾心法應注意的問題。

　　雙抗1體夾心法測抗原的另一注意點是類風1濕因子（RF）的干擾。RF是一種自身抗1體，多為IgM型，能和多種動物IgG的Fc段結合。用作雙抗1體夾心法檢測的血1清標本中如含有RF，它可充當抗原成份，同時與固相抗1體和酶標抗1體結合，表現(xiàn)出假陽性反應。采用F（ab"）或Fab片段作酶結合物的***，由于去除了Fc段，從而消除RF的干擾。雙抗1體夾心法ELISA***是否受RF的影響，已被列為這類***的一項考核指標（參見6.2）。

　　雙抗1體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。

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3、染色弱 原因 解決辦法 抗1體濃度過低，孵育時間過短 提高抗1體濃度，孵育時間不能少于60分鐘 ***超過有效使用期 及時更換*** 操作中，滴加***時緩沖液未瀝干，致 使***稀釋 每步滴加***前瀝干切片中多余的緩沖液（但防止切片干燥） 室溫太低，低于15℃ 若室溫低于15度，要改放在37℃孵育箱孵育30-60分鐘（或4℃冰 箱過夜） 蛋白封閉過度 封閉時間不要超過10分鐘 4、染色陰性 原因 解決辦法 操作步驟錯誤 重新試驗，設立陽性對照 ***中無抗原 設立陽性對照片，以驗證實驗結果 一抗與二抗種屬連接錯誤 仔細確定一抗與二抗種屬無誤

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3. 洗滌

材料經固定后，PBS或雙蒸水沖洗約3小時。（20，30，30，60）

4. 脫水

材料依次經80%、90%、100%、100%各級乙醇溶液脫水，各30min

注意事項：

（1）脫水必須在有蓋的玻璃品中進行，防止吸收空氣中的水分。

（2）在更換高一級的脫水劑時，酶聯(lián)******盒現(xiàn)貨，1好不要移動材料以免損壞，可用吸管吸出器皿中的脫水劑，再用吸水吸盡器皿內剩余液，然后于皿中加入高一級脫水劑。

（3）在低濃度酒精中，每級停留不宜太長，否則易使***變軟，助長材料的解體。

（4）在高濃度或純酒精中，每級停留的時間也不宜太長，否則會使***變脆，影響切片。

（5）如需過夜，應停留在80%酒精中。