適用場(chǎng)景

1、高靈敏度地檢測(cè)蛋白-蛋白的交互作用；

2、尋找在蛋白-蛋白交互作用中起關(guān)鍵作用的結(jié)構(gòu)域或活性位點(diǎn)；

3、尋找與靶蛋白相互作用的新蛋白；

4、尋找具有藥1物治1療作用的小分子多肽；

5、尋找調(diào)控蛋白質(zhì)相互作用的化合物；

6、繪制蛋白質(zhì)相互作用圖譜。

酵母雙雜交技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)

1、無需純化蛋白；

2、檢測(cè)在活1細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行，可以在一定程度上代表體內(nèi)的真實(shí)情況；

3、檢測(cè)的結(jié)果是***表達(dá)產(chǎn)物的積累效應(yīng)，因而可檢測(cè)存在于蛋白質(zhì)之間的微弱的或暫時(shí)的相互作用；

4、酵母雙雜交系統(tǒng)可采用不同***、器1官、細(xì)胞類型和分化時(shí)期材料構(gòu)建cDNA文庫，并能分析細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞核等多種亞細(xì)胞部位的蛋白。

原位雜交（in situ hybridization）將標(biāo)記的核酸探針與細(xì)胞或***中的核酸進(jìn)行雜交，稱為原位雜交，使用DNA或者RNA探針來檢測(cè)與其互補(bǔ)的另一條鏈在***或其他真核細(xì)胞中的位置。

       原位雜交技術(shù)的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補(bǔ)的堿基序列，植物***RNA原位雜交技術(shù)服務(wù)，將有放1射性或非放1射性的外源核酸(即探針)與***、細(xì)胞或染色體上待測(cè)DNA或RNA互補(bǔ)配對(duì)，結(jié)合成專一的核酸雜交分子，經(jīng)一定的檢測(cè)手段將待測(cè)核酸在***、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個(gè)重要條件：***、細(xì)胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補(bǔ)的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標(biāo)記物

       

目前，我國已穩(wěn)定開展的分子病理技術(shù)主要有顯色原位雜交、熒光原位雜交、PCR、熒光定量PCR、***芯片和DNA測(cè)序技術(shù)。顯色原位雜交(chromogenicinsituhybridization，CISH)技術(shù)是分子生物學(xué)、***化學(xué)及細(xì)胞學(xué)相結(jié)合產(chǎn)生的一門新興技術(shù)，是利用核酸分子單鏈間堿基互補(bǔ)的原理，將地1高辛或生物素標(biāo)記的外源核酸探針與***、細(xì)胞或染色體上待測(cè)DNA或RNA互補(bǔ)配對(duì)，結(jié)合成雙鏈雜交分子，通過過氧化物酶或堿性磷酸酶的呈色反應(yīng)將待測(cè)核酸在***、細(xì)胞或染色體上的位置顯示出來。根據(jù)探針種類不同可分為DNA原位雜交和RNA原位雜交。


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